Panoramica
PTI RatioMaster è un sistema di microscopio monocromatore ad ampio campo per misurare il rapporto di fluorescenza o l'intensità del colorante a fluorescenza delle proteine marcate in concentrazioni nanomolari. La microscopia in rapporto-fluorescenza è l'ultimo strumento per studiare gli eventi dinamici nelle cellule vive e nelle strutture cellulari. A differenza della tradizionale microscopia a fluorescenza basata sull'intensità, il rapporto-fluorescenza elimina gli effetti dello sbiancamento fotografico, la variazione della lunghezza del percorso cellulare, la non uniformità del carico del colorante, il campo visivo non uniforme, rendendo il rapporto-fluorescenza il metodo più accurato per determinare le concentrazioni di ioni intracellulari. Ancora più importante, PTI RatioMaster è abbastanza veloce da fornire informazioni dinamiche essenziali sulle concentrazioni di ioni e le interazioni con altre molecole, farmaci o reagenti aggiunti.
Il PTI RatioMaster è in grado di effettuare misure di fluorescenza in rapporto dinamico su un arco di tempo di un millisecondo. Una lampada ad arco di xeno fornisce un'illuminazione a banda larga continua ad alta intensità. Le lunghezze d'onda di eccitazione alternata sono selezionate da un monocromatore ad accesso casuale ad alta velocità controllato dal computer accoppiato ad un microscopio a fluorescenza (specificato dall'utente/fornito) in posizione verticale o invertita, con una guida a luce liquida. La luce emessa viene raccolta dal campione e fatta passare attraverso un fotometro con un'iride bilaterale traducibile e un oculare di visualizzazione ad un rivelatore fotomoltiplicatore analogico/fotonico commutabile. Il rilevamento analogico viene utilizzato quando la luce emessa è relativamente intensa; bassi livelli di luce vengono rilevati dal conteggio dei fotoni. Tutte le funzioni del sistema sono sotto il controllo del computer. I dati vengono raccolti e analizzati da un software proprietario Windows FelixGX basato sul software avanzato di fluorescenza.
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